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雙型態呈色酵素報告基因系統:高通量藥物篩選的新選擇
2025-01-07
林文瑋副教授團隊/高雄醫學大學學士後醫學系、高雄醫學大學生物醫學暨環境生物學系

林文瑋、鄭添祿、張慕申、李佳怡、趙玹

本團隊開發出一個半衰期長、成本低廉、操作方便及反應效率高的篩藥報告基因系統。透過呈色酵素(1)表現到細胞膜上形成膜表現呈色酵素(membrane-tethered chromogenic enzyme, MTCE)作為報告者(2)將呈色酵素以基因工程之方式分泌至細胞外(secreted chromogenic enzyme , SCE),兩者合併成為雙型態呈色酵素(dual-structured chromogenic enzyme, DSCE)具有以下優點:(1) 受質便宜,可降低成本、(2)酵素均表現在細胞膜或分泌至細胞外,使受質與酵素直接作用、(3)使膜上MTCE與分泌型SCE一方作為報告基因、另一方作為內部控制組(internal control),控制每次實驗皆具有相同之轉染效率(4)訊號半衰期長且穩定性高、(5)偵測之儀器_ELISA reader相當普遍,適合所有實驗室使用。因此,本技術是第一個將膜表現呈色酵素和篩藥報告基因系統結合,搭配分泌型呈色酵素,使其具有高敏感度、成本低廉、操作方便、半衰期長等優勢,以造福使用者大幅降低高通量藥物篩選時之成本並提高藥物開發效率。

評審推薦
1.創新篩藥報告基因系統,具半衰期長、操作方便、反應效率高且成本低之特色,具商化潛力。
2.將膜表現呈色酵素和篩藥報告基因系統結合,搭配分泌型呈色酵素,解決現行雙冷光素酶報告試驗(Dual luciferase reporter assays)使用問題,大幅降低高通量藥物篩選之成本並提高藥物開發效率。
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