※賓州大學(Penn State)開發出以一滴血液測量愛滋病病毒(HIV)的數量的檢測方法,與目前的方法相比,這個技術速度更快、成本更低,盼能取代傳統RT-PCR檢測。(Photo credit: Penn state and Prof. Weihua Guan)
賓州大學(Penn State)的研究團隊開發出一種新的檢測方法,可以直接以一滴血液測量愛滋病病毒(HIV)的數量。與目前的方法相比,這個技術速度更快、成本更低。目前,用於評估患者血液中的HIV含量常規使用的是RT-PCR,需要先放大遺傳物質,然後才能進行測量。這種方法耗時長,而且不能直接測量病毒數量,只能提供一個接近的估計值。而這項最新的技術名為「STAMP(Self-digitization Through Automated Membrane-based Partitioning)」,能直接測量一滴血液中的病毒含量。這個技術透過病毒RNA與Cas13蛋白(CRISPR-Cas系統的一部分)混合,而當系統被HIV的RNA活化時,Cas13會裂解一個報導分子(reporter molecule),從而產生可測量的訊號。與RT-PCR相比,這個檢驗方法速度更快、成本更低、所需的血液量更少。
測量HIV病毒數量是在治療過程中監測患者病情進展的重要步驟。根據感染階段和患者的治療史,每滴血液中的病毒數量可相差很大,從20個病毒顆粒到50多萬個不等。有必要在治療過程中多次測量病毒數量,以確保治療進展符合要求。然而,目前的檢測方法耗時長、成本高,而且不能直接測量病毒數量,只能進行推算。
為了創造更直接、速度更快、成本更低的診斷技術,這個研究團隊將目光轉向了CRISPR-Cas系統。CRISPR-Cas系統作為一種基因編輯工具正在逐漸被人們所知,但由於它具備高度特異性和操作遺傳物質,因此在診斷技術中也能發揮作用。
賓州大學的STAMP檢測方法包含將HIV RNA與Cas13混合。然後,研究團隊將含有奈米孔洞的聚碳酸酯膜覆蓋在樣品上。這些孔洞非常小,只允許一個微小的低液進入,其中包含一個附有Cas13蛋白的RNA分子。在HIV RNA存在的情況下,Cas13蛋白被活化,裂解成一個報導分子,產生一個可測量的訊號,這個訊號可以在奈米孔洞封閉的滴液中被觀察到。
「透過計算顯示出這種訊號的滴液數量,我們可以確定患者血液中的HIV含量。帶有這種訊號的滴液越多,病毒數量就越高。雖然還需要進一步改進以提高其檢驗極限和自動化的設備,但基於STAMP的方法在推進HIV病毒數量監測方面顯示出巨大的潛力。」這項研究的計畫主持人Weihua Guan副教授說道。
(來源:Medgadget 生策中心編譯)
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